目的 建立一种多重实时荧光定量反转录聚合酶链式反应（多重实时qRT-PCR）法，用于阿龙山病毒（Alongshan virus，ALSV）及松岭病毒（Songling virus，SGLV）核酸的快速检测。 方法 针对ALSV NS 3基因和SGLV S基因保守区设计特异性引物及TaqMan探针，建立针对2种病毒的多重实时qRT-PCR检测方法，评价方法的特异性、灵敏度和重复性，并应用蜱标本对该方法进行应用评价。 结果 该检测方法与森林脑炎病毒等其他6种虫媒病毒无交叉反应，灵敏度达1×10 ¹拷贝/μl，重复性检测的循环阈值（ Ct）变异系数均<2.00％；运用该方法，从2019年黑龙江省采集的30组蜱标本中检出2组ALSV阳性，1组SGLV阳性。经验证，该方法与普通PCR方法检测结果的一致性为100%。 结论 建立了敏感性高、特异性好的ALSV和SGLV多重实时qRT-PCR快速检测方法。

目的 建立流行性乙型脑炎病毒（JEV）和西尼罗病毒（WNV）的双重微滴式数字PCR（ddPCR）检测方法。 方法 基于已设计的JEV和WNV引物探针,建立JEV和WNV双重ddPCR检测反应体系,摸索检测的敏感性、特异性和可重复性,灵敏度与双重荧光定量PCR（qPCR）的每个反应管内荧光信号达到设定的阈值所经历的循环数（ Ct）值做对比。 结果 双重ddPCR检测反应体系对JEV和WNV的检测灵敏度均可达到10 ²拷贝/μl,该方法的可重复性、特异性良好,未发现与登革病毒、基孔肯雅病毒、寨卡病毒、蜱传脑炎病毒以及人类基因组有交叉反应。 结论 建立的双重ddPCR方法能敏感、特异检测JEV和WNV,为不同场景下这2种病毒的检测提供了解决方案。

目的 调查山西省武乡县白蛉标本携带病毒的种类及其流行情况。 方法 2018年6月在山西省武乡县采集白蛉标本，使用实验室保存的金黄地鼠肾细胞（BHK-21细胞）和白纹伊蚊卵细胞（C6/36细胞）2种细胞系进行病毒分离，阳性分离物经病毒RNA提取、cDNA文库制备后，进行病毒基因扩增与核苷酸序列测定及系统进化分析。 结果 SXWX1816-2病毒分离株可引起哺乳动物细胞（BHK-21细胞）病变，但是对昆虫细胞（C6/36细胞）并不引起病变。病毒基因组核苷酸序列测定和分析结果显示该病毒M基因和S基因编码区核苷酸序列长度分别为4 089和1 611 nt；病毒M基因和S基因核苷酸/氨基酸序列同源性分析和分子遗传进化分析结果均表明SXWX1816-2分离株隶属于白纤病毒科白蛉病毒属，并与我国此前分离的武乡病毒（Wuxiang virus，WUXV）的同源性最高，病毒基因分子遗传进化关系最近。 结论 明确了我国白蛉分离病毒（SXWX1816-2）的分类地位，研究结果为我国吸血昆虫携带病毒，特别是白蛉携带和传播病毒的研究提供了重要的基础数据。

目的 调查中国江西、云南等8省（自治区）31县（旗、市）吸血蠓种分布。 方法 2013－2018年在中国江西、云南等8省（自治区）31县（旗、市）的居住区、牛舍、羊舍、鸡舍、猪舍、鸭舍、菜地等场所采用诱虫灯采集吸血蠓；采用树胶酚封片法制作玻片标本。 结果 采获吸血蠓184 314只，共计2属72种，其中库蠓属63种，蠛蠓属9种。内蒙古3县（旗）7种，新疆1县4种，贵州1县16种，四川2县（市）9种，江西10县（市）27种，湖南3县20种，云南6县（市）36种，海南5县（市）28种。从主要蠓种省、市分布来看，刺螫库蠓分布在7省（自治区）19县（市），原野库蠓分布在7省（自治区）18县（市），荒川库蠓分布在6省（自治区）27县（市），尖喙库蠓分布在6省（自治区）23县（市），褐肩库蠓分布在6省（自治区）12县（市），日本库蠓分布在5省（自治区）12县（市）。刺螫库蠓、原野库蠓、荒川库蠓、尖喙库蠓和日本库蠓在牛舍、羊舍、猪舍、鸡舍和居住区5种场所均有分布。 结论 采集到中国8省（自治区）31县（旗、市）的吸血蠓2属72种；刺螫库蠓、原野库蠓、荒川库蠓、尖喙库蠓、日本库蠓和褐肩库蠓6种库蠓为本次调查8省（自治区）31县（市）5种场所广布的吸血蠓种。

目的 调查海南省琼中县吸血昆虫及其携带病毒的种类以及流行情况。 方法 2019年8月在当地吸血昆虫孳生环境（羊圈、猪圈）中，使用“功夫小帅”牌紫外诱蚊灯进行标本采集并使用干冰运输到实验室。采用病毒学和分子生物学方法分离病毒并对病毒分离物进行鉴定。 结果 共采集到蚊虫3属34只（其中库蚊26只、按蚊1只和骚扰阿蚊7只）和蠓虫（待鉴定）1 450只。从采集的蠓虫标本中分离到1株可以引起白纹伊蚊C6/36细胞病变的病毒分离株（HNQZ1927），该病毒不引起金黄地鼠肾细胞（BHK-21）病变。经病毒基因扩增和核苷酸序列测定与分析，结果显示HNQZ1927为10个基因节段的环状病毒属病毒，该病毒基因编码区核苷酸（氨基酸）与环状病毒属中的西藏环状病毒（TIBOV）同源性为79.4%～98.7%（94.6%～100%），而与TIBOV以外的其他环状病毒同源性在1.2%～78.1%。病毒基因组系统进化分析表明，HNQZ1927病毒与我国此前在西藏地区采集的圆斑按蚊中分离的TIBOV XZ0906及我国在三带喙库蚊、致倦库蚊和多种蠓虫中分离的TIBOV处于共同进化分支。 结论 海南省蠓虫分离的HNQZ1927病毒为TIBOV，这是首次从海南省自然界采集的蠓虫标本中分离到TIBOV 。

目的 调查江西省东北部及中西部10县（市）的吸血蠓种类分布和生态习性。 方法 在江西省东北部黎川、资溪、鹰潭、铅山、玉山、浮梁及中西部永丰、峡江、安福、井冈山10县（市）采用诱虫灯诱集吸血蠓类；选择吸血蠓完整个体，采用加拿大树胶酚封片法制作玻片标本，并进行分类鉴定。 结果 2018年6-7月在江西省东北部6县（市）和中西部4县（市）采获吸血蠓45 999只，计2属27种，其中库蠓属25种，蠛蠓属2种；江西省首次记录11种，包括棒须库蠓、黄盾库蠓、无害库蠓、连斑库蠓、卢特库蠓、缘斑库蠓、新替库蠓、褐肩库蠓、条带库蠓、细须库蠓和吊罗蠛蠓；东北部6县（市）分布26种，中西部4县（市）分布13种。优势种为荒川库蠓（45.31%）和尖喙库蠓（16.71%）；东北部地区优势种为荒川库蠓（28.54%）和尖喙库蠓（22.05%）；中西部地区优势种为荒川库蠓（91.91%）。不同场所的吸血蠓种分布和主要种群组成不同。7种主要吸血蠓的总吸血率为16.56%；其中尖喙库蠓最高（43.90%），荒川库蠓最低（6.06%）。6种场所灯诱吸血蠓总指数为943.54只/灯；其中牛舍最高（1 297.78只/灯），羊舍最低（684.25只/灯）。不同蠓种及不同场所的吸血率和灯诱指数不同。 结论 掌握了江西省吸血蠓的区系分布和生态习性，为蠓媒疾病研究和防治提供了参考依据。

该文报道了2017年在海南省文昌、儋州市和澄迈县采获的吸血蠓2属23种，其中库蠓属22种，蠛蠓属1种；发现1新种，儋州库蠓（ Culicoides danzhouensis Liu et Liang，sp.nov.）；中国新纪录1种，汸克库蠓（ C.pangkorensis Wirth et Hubert，1989 ）；海南省首次记录1种，柯卡库蠓（ C.calcaratus Wirth et Hubert，1989 ）。文昌市分布17种，儋州市18种，澄迈县19种。儋州库蠓的翅与曲斑库蠓（ C.recurvus Delfinado，1961）相近似，但后者触须短，触须比2.2；雄虫阳基侧突有窄的愈合，近中部外侧无角突，第9背板后缘中部有一微突，第9腹板膜无微毛与本新种明显不同。儋州库蠓雄虫的尾器与泸水库蠓（ C.lushuiensis Liu et Feng，2018）也相近似，但后者翅面淡斑的数量和形态第9腹板膜无微毛，阳茎拱高约为阳茎中叶总长的1/5与本新种明显不相同。新种模式标本保存在北部战区疾病预防控制中心（沈阳110034）。

该文报道了2017年中国-缅甸边境云南省的泸水、福贡、贡山县采获的吸血蠓2属16种，包括库蠓属15种，蠛蠓属1种；新发现库蠓属库蠓亚属1新种：泸水库蠓[ Culicoides（ C.） lushuiensis Liu et Feng，sp.nov.]；云南省首次纪录3种，即多孔库蠓、新替库蠓、海南蠛蠓。泸水库蠓与杜比库蠓（ C.dubius Arnaud，1956）相近似，但后者雌虫翅臀室近端部的淡斑卵圆形，触须比为3.00；雄虫第9腹板后缘凹陷呈宽"V"形，第9背板后缘微突，抱器基节腹踝矩刺状，阳茎中叶端部短而粗，阳茎拱高约为阳茎中叶总长的1/2与本新种明显不相同。新种模式标本保存在沈阳军区CDC（沈阳110034）。

目的 对分离自中华按蚊的版纳病毒进行病毒全基因组核苷酸序列测定和分子遗传学分析。 方法 使用分子病毒学方法测定病毒全基因组12节段核苷酸序列，以生物信息学软件进行序列比对、同源性和分子遗传进化分析。 结果 2012年从云南省中缅边境地区中华按蚊分离的版纳病毒（YN12234病毒株）能在C6/36细胞引起细胞病变并稳定传代，该病毒为12节段RNA病毒。根据病毒VP1蛋白（RdRp）氨基酸序列进行的分子遗传进化分析发现，YN12234病毒属于呼肠孤病毒科东南亚12节段RNA病毒属版纳病毒。对第12节段基因序列的进一步分析显示，YN12234病毒属于A2基因型版纳病毒。系统进化分析结果还显示，从中华按蚊分离的版纳病毒与此前从中华按蚊分离的版纳病毒处在不同进化分支，且不同蚊虫分离的版纳病毒并非聚类在共同的进化分支。 结论 从中华按蚊分离的YN12234病毒株属于含有12节段的版纳病毒，分子进化分析结果提示包括云南省分离的YN12234病毒在内的目前国内外从蚊虫分离的版纳病毒并不存在病毒与蚊虫种类之间的媒介适应性。

目的 了解贵州省东北部地区蚊虫以及蚊传虫媒病毒的种类及其分布。 方法 2017年在贵州省德江、江口县村庄的动物饲养圈使用诱蚊灯采集蚊虫，现场分类并冻存于液氮备用。采集的蚊虫标本在实验室处理后接种BHK-21和C6/36细胞分离病毒，同时进行标本中病毒基因检测。使用生物信息学软件对病毒基因组开展分子遗传学分析。 结果 2017年在贵州省德江县龙泉乡居池坝村、青龙镇石打头村、江口县快场村共采集蚊虫3属3种7 380只，其中骚扰阿蚊最多，占采集蚊虫总数的61.55%（4 542/7 380），中华按蚊占26.80%（1 978/7 380），三带喙库蚊810只以及其他蚊虫50只。从蚊虫中分离到3株引起组织培养细胞病变的病毒分离物；经分子生物学鉴定，从三带喙库蚊中分离的病毒株GZDJ1765属于Ⅰ型流行性乙型脑炎（乙脑）病毒，另2株病毒株均来自骚扰阿蚊（GZDJ1746-1、GZDJ1752-1），经鉴定为盖塔病毒。3批蚊虫（GZDJ1704、GZDJ1743-2、GZDJ1751-2）乙脑病毒基因PCR检测均为阳性。 结论 贵州省东北部地区所调查的农村地区动物饲养圈骚扰阿蚊为优势蚊种，蚊虫中携带乙脑病毒和盖塔病毒。

该文报道了广东省恩平市吸血蠓一新种和一中国新纪录种：恩平库蠓（ Culicoides enpingensis Wu et Liu，sp.nov.）和柯卡库蠓（ C.calcaratus Wirth et Hubert，1989）。恩平库蠓与龙溪库蠓（ C.lunchiensis Chen et Tsai，1962）相近似，但后者翅径5室和臀室基部淡斑的形状不同；雄虫阳茎中叶端部有1对耳状突，末端钝圆，阳基侧突端部有细分枝与本新种明显不同。新种模式标本保存在沈阳军区CDC （沈阳110034）。

该文报道了2016年在贵州省德江县诱集的吸血蠓2属16种，包括库蠓属13种和蠛蠓属3种；新发现库蠓属屋室亚属1新种：青龙库蠓〔 Culicoides（ Oecacta） qinglongensis Liu，sp.nov.〕；贵州省首次纪录5种，分别为琉球库蠓、孔庙库蠓、新替库蠓、褐肩库蠓和儋县蠛蠓。青龙库蠓与冲绳库蠓（ C.okinawensis Arnaud，1956）相近似，后者翅长1.38 mm，触角嗅觉器分布在3~14节，触角比为1.28，大颚齿17枚；雄虫阳茎中叶，阳基侧突，抱器基节腹踝的形态与本新种明显不同。新种模式标本保存在沈阳军区疾病预防控制中心（沈阳110034）。

目的 设计版纳病毒型别特异性测序引物，为构建快速高效经济的版纳病毒全基因组测序平台奠定基础。方法 根据GenBank已知的版纳病毒基因序列信息进行基因型分析，采用Primer Premier v6.0及Oligo 7.56软件完成版纳病毒亚型特异性扩增引物的设计与评估。使用中国分离的30株版纳病毒进行版纳病毒型别特异性引物工作效率验证和评估。结果 通过对30株隶属于2个不同基因亚型的版纳病毒开展全基因组序列测定，获得2套型别工作效率高、扩增效果稳定的基因A型特异性版纳病毒全基因组序列扩增测序引物。基因A1亚型引物一套共26对；基因A2亚型引物一套共计30对。完成了30株版纳病毒全基因组序列扩增。结论 设计的版纳病毒型别特异性扩增测序引物可以高效准确地完成版纳病毒全基因组序列扩增，为进一步深入研究版纳病毒分子生物学特征奠定了基础。

目的 调查中国云南省中国-老挝边境（中老边境）3个市（县）吸血蠓的种类分布、种群组成及吸血率。方法 2015年6－8月采用诱虫灯诱集吸血蠓，参考中老边境吸血蠓种分布的相关文献。结果 共采集吸血蠓3属54种78 336只，其中细蠓属4种，蠛蠓属7种，库蠓属43种；云南省首次纪录种7种：宗库蠓、霍飞库蠓、洋岛库蠓、南山库蠓、褐肩库蠓、杂色库蠓、隐秘蠛蠓。勐腊、江城县和景洪市分别分布48、22和16种。优势种为连斑库蠓、褐肩库蠓和抚须库蠓，分别占捕获总数的25.93%、19.25%和17.13%；不同市（县）、不同生境蠓种组成及吸血率不同。居住区和牛场的蠓吸血率分别为32.26%和28.24%。结论 为中老边境吸血蠓种类分布、种群组成和蠓媒疾病的研究提供了参考依据。

目的 利用TaqMan 实时荧光定量PCR技术,建立巴泰病毒(Batai virus,BATV)实时荧光定量PCR检测方法。方法 根据GenBank发表的BATV基因序列资料分析结果,在其S片段编码非结构蛋白的基因区段设计BATV特异引物与探针,利用不同科、属的13株病毒核酸验证方法特异性,利用体外转录的定量RNA标准品建立基因拷贝数定量分析模型,重复实验检验方法的稳定性。结果 引物与探针具有良好的特异性,定量分析模型的灵敏度为10拷贝/μl,同一样品重复检测循环阈值的变异系数均<2.50%。结论 建立了一种特异、灵敏、高效的BATV一步法TaqMan 实时荧光定量PCR检测方法,为今后该病毒的检测与研究工作提供技术手段。

目的 继续调查湖北省蚊媒和病毒种类及其分布状况。方法 2010年夏季在湖北省恩施州、神农架林区、江陵县和随州市采集蚊虫标本, 用组织培养法分离病毒, 用血清学和分子生物学方法对阳性病毒分离物进行鉴定, 利用生物信息学软件对新分离病毒进行序列同源性和系统进化分析。结果 采集到3属4种12 845只蚊虫标本, 共分离到38株阳性分离物, 经血清学和分子生物学鉴定, 32株阳性分离物为流行性乙型脑炎病毒(JEV), 5株阳性分离物为盖塔病毒, 1株为JEV和盖塔病毒感染混合株。JEV E基因序列进化分析显示新分离JEV均为基因Ⅰ型JEV。盖塔病毒NS2基因序列进化分析显示新分离病毒与中国河北省和韩国毒株同源性最高, 与俄罗斯分离株进化关系较远。结论 首次在湖北省分离到盖塔病毒, 并再次在湖北省分离到基因Ⅰ型JEV。

目的 了解河南省部分地区蚊传虫媒病毒的种类分布及基因型别。方法 于2012年5－8月在河南省洛阳市新安县和信阳市息县的居民住房、猪圈、牛棚及树林中采集蚊虫。使用细胞培养法分离病毒, 通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法进行种属特异扩增鉴定, 并用Clustal X2.1、MegAlign、Genedoc 3.2和Mega v5.1生物信息学软件完成病毒核酸序列的分子生物学分析并进行基因分型。结果 共采集蚊虫4属5种7149只, 其中新安县以骚扰阿蚊居多(2055只, 51.36%), 息县以淡色库蚊(2964只, 94.16%)为主。共分离获得5株病毒, 直接接种BHK-21细胞无病变、C6/36细胞培养仅导致轻微病变, 其C6/36细胞传代培养物转接BHK-21细胞后3 d可致细胞明显病变;序列分析表明这5株病毒均属基因Ⅰ型流行性乙型脑炎病毒(JEV), 其中3株分离自淡色库蚊, 2株来自三带喙库蚊。结论 河南省部分地区依然存在JEV及其传播媒介, 且目前当地自然界中循环的JEV仍以基因Ⅰ型为主。

目的 对青海省蚊虫标本中新分离的QH07130病毒株进行系统鉴定分析。方法 采用血清学和分子生物学方法对QH07130病毒进行鉴定,并对该病毒进行系统进化特征分析。结果 QH07130病毒株对C6/36细胞产生明显细胞病变;间接免疫荧光试验显示,QH07130病毒株与辽宁病毒(LNV)单克隆抗体呈现阳性反应。聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,QH07130病毒为12条带双链RNA病毒,与LNV的6-5-1带型一致。该病毒第10节段序列测定全长为844 bp,与LNV SX0771和NE9712株核苷酸同源性分别为99.5%和98.0%;系统进化分析显示,QH07130病毒位于LNV进化分支内,并且与LNV SX0771和NE9712株的进化关系最近,确认QH07130病毒为LNV。结论 青海省蚊虫中存在LNV传播,这是首次在位于青藏高原的青海省分离到该病毒。

目的 了解贵州省虫媒病毒中巴马森林病毒(BFV)、罗斯河病毒(RRV)的感染现状,为不明原因病毒性脑炎防治工作提供科学依据。方法 2005-2008年在贵州省采集不明原因发热和病毒性脑炎病例检测BFV、RRVIgM抗体,并对2007年健康人群进行BFV、RRVIgG抗体检测。结果 ①共检测204例不明原因发热病例BFV和RRVIgM抗体,BFVIgM抗体阳性4例,阳性率1.96%,RRV阳性6例,阳性率2.94%;②共检测426例病毒性脑炎病例BFV和RRVIgM抗体,BFVIgM抗体阳性12例,阳性率2.82%,RRV阳性15例,阳性率3.52%;③共检测870份健康人群BFV、RRVIgG抗体,BFVIgG抗体阳性率1.49%,RRVIgG抗体阳性率1.15%;④地区分布显示,2005-2008年BFV、RRVIgM抗体阳性病例数和分布县数呈逐年增加趋势。结论 贵州省可能存在由BFV和RRV感染引起的疾病,应加强对这两种病毒引起的相关疾病监测和研究工作。

目的 调查甘肃省河西走廊地区蚊虫种类及所携带虫媒病毒分布状况。方法 使用诱蚊灯于18：00至次日06：00进行蚊虫标本采集,分类鉴定后液氮保存并运送至实验室备检;通过组织培养法分离病毒,并对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定;利用生物信息学技术对新分离病毒的序列进行分析,完成同源性和系统发生分析。结果 2011年8月在甘肃省河西走廊地区7个县(市)共采集到蚊虫标本3属6种24028只,其中刺扰伊蚊最多,占采集总数的32.80%(7880/24028),淡色库蚊占30.26%(7272/24028);通过细胞培养分离到1株可以引起两种细胞(BHK-21和C6/36细胞)病变的病毒分离株(GS11-155);此外在32批蚊虫标本中检测到病毒(库蚊黄病毒、盖塔病毒、辽宁病毒)基因阳性,对其中11批核苷酸序列测定和分析发现,1批为蚊传黄病毒,3批为盖塔病毒,7批为辽宁病毒。结论 甘肃省河西走廊地区优势蚊种为刺扰伊蚊,且蚊虫携带多种虫媒病毒,包括蚊传黄病毒、盖塔病毒和辽宁病毒。

目的 调查湖北省部分地区蚊传虫媒病毒种类和分布状况。方法 2009年夏季在湖北省黄冈市武穴市和咸宁市通城县采集蚊虫标本,用组织培养法分离病毒,用血清学和分子生物学方法 对阳性病毒分离物进行鉴定,利用生物信息学软件对新分离病毒进行序列同源性和系统进化分析。结果 采集到3属5种9424只蚊虫标本,阳性4株(HBTC0913、HBTC0917、HBTC0919和HBTC0921),经血清学和分子生物学鉴定均为版纳病毒;版纳病毒第12节段分子进化分析显示,4株新分离版纳病毒与中国北京、云南和内蒙古地区以及越南的分离株处于同一亚群,而印度尼西亚分离株处于另外一个进化群中;新分离株与其他分离株相比,第12节段编码区核苷酸同源性为87.2%～89.8%,氨基酸同源性为86.1%～90.9%。结论 在湖北省分离到版纳病毒,与中国云南毒株YN6的进化关系较近。

目的 调查贵州省不同地区虫媒病毒分布状况,对采集的蚊虫标本进行病毒分离与鉴定。方法 2008年7月在贵州省黔西、德江、榕江和从江县的4个标本采集点使用诱蚊灯采集蚊虫标本,通过组织培养法分离病毒,并对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定;利用生物信息学技术对新分离病毒的序列进行分析,完成同源性和系统发生分析。结果 采集到3属4种共计9160只蚊虫标本,从中分离到9株病毒,鉴定结果显示8株为盖塔病毒,1株为流行性乙型脑炎病毒(JEV);贵州省新分离盖塔病毒与原型株相比,核苷酸同源性为94.5%～94.9%,氨基酸同源性为97.4%～97.6%;新分离JEV与基因Ⅰ型JEV的同源性最高,系统进化分析结果显示属于基因Ⅰ型JEV。结论 在贵州省分离到盖塔病毒和基因Ⅰ型JEV。盖塔病毒新分离株与我国其他省份分离株进化关系较近;JEV新分离株与四川省分离株进化关系较近。

目的 了解云南省西双版纳地区蚊虫媒介的分布特点及当地虫媒病毒情况,为虫媒病毒病防治提供科学依据。方法 在云南省西双版纳州采集蚊虫标本,用细胞培养法分离病毒,并用RT-PCR法检测常见虫媒病毒核酸;在西双版纳州采集发热患者血清及脑脊液标本,并用ELISA法检测常见病毒性脑炎IgM抗体。结果 共采获蚊虫5属29种13337只,其中三带喙库蚊、中华按蚊、带足按蚊分别占蚊虫标本总数的79.98%(10667/13337)、7.95%(1060/13337)和7.38%(984/13337),三带喙库蚊为当地优势蚊种。采用流行性乙型脑炎(乙脑)病毒、版纳病毒、甲病毒属、环状病毒等多种虫媒病毒引物对214批蚊虫标本进行PCR检测,结果均为阴性;采用多种细胞对蚊虫标本进行病毒分离,结果也为阴性。用相关脑炎病毒试剂盒对采集到的52份急性期血清标本及54份脑脊液标本进行ELISA检测,发现乙脑病毒IgM阳性16例,单纯疱疹病毒IgM抗体阳性4例,腮腺炎病毒IgM抗体阳性13例,埃可病毒IgM抗体阳性3例,登革热病毒IgM抗体阳性1例。结论 2011年西双版纳地区采集到的蚊虫标本中未检测到乙脑、版纳及环状病毒等虫媒病毒,但血清学检测结果表明当地发热患者存在乙脑等多种病毒性脑炎感染。

目的 了解辽宁省丹东市鸭绿江沿岸虫媒病毒的种类和分布情况。方法 使用诱蚊灯捕蚊,通过组织培养法分离病毒,并对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定。结果 2007年7月在辽宁省丹东市鸭绿江沿岸6个采集点采集到3属3种共3359只蚊虫标本,从中分离到11株病毒分离物,鉴定结果显示有5株为版纳病毒,3株为环状病毒样病毒,其余3株分离物有待进一步鉴定;版纳病毒新分离株序列分析结果显示,5株版纳病毒之间第12片段序列高度同源,核苷酸同源性为92.1%～99.8%;氨基酸同源性为92.8%～99.5%;并且与北京分离株和云南分离株同源性较高,核苷酸同源性为91.3%～98.7%;氨基酸同源性为90.8%～100%;系统进化分析提示,版纳病毒新分离株与北京、云南分离株位于同一个进化分支中。结论 在辽宁省丹东市鸭绿江沿岸首次分离到版纳病毒和环状病毒样病毒,新分离版纳病毒与北京、云南分离株进化关系较近。

目的 掌握上海市流行性乙型脑炎(乙脑)病毒基因型别特征。方法 2002-2005年在上海市奉贤县养猪场采集蚊虫标本,研磨处理后分离病毒,完成病毒细胞学、动物学、血清学及分子生物学鉴定。测定病毒全基因组序列,应用ATGC、ClustalX(1.83)、MegAlign、GeneDoc3.2和Mega5.0等生物学软件完成序列拼接、比对、核苷酸与氨基酸同源性分析、系统进化分析。结果 共采集38347只蚊虫标本,主要是三带喙库蚊。分离到13株乙脑病毒。测定13株乙脑病毒全基因组序列,结合上海市其他年份分离的乙脑病毒及涵盖5个基因型别的其他乙脑病毒全基因组序列,通过系统进化分析发现,上海市2001、2003、2005和2007年分离的乙脑病毒属于基因Ⅰ型,2004年和2006年分离的乙脑病毒属于基因Ⅲ型。结论 2种基因型别乙脑病毒(Ⅰ、Ⅲ型)在上海市共同流行。

目的 在安徽省不同地区开展流行性乙型脑炎病毒(JEV)病原学调查,了解当地JEV的基因型别及分子特征。方法 2010年8月在安徽省阜阳、淮南、安庆市的3个标本采集点使用诱蚊灯采集蚊虫标本,通过组织培养法分离病毒,并对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定;利用生物信息学技术对新分离病毒的序列进行分析,完成同源性和系统发生分析。结果 采集到3属3种共计7651只蚊虫标本,通过组织培养技术分离得到11株病毒分离物,鉴定结果显示均为基因Ⅰ型JEV。安徽省JEV新分离株与基因Ⅰ型JEV的同源性最高,核苷酸同源性为96.8%～99.5%,氨基酸同源性为97.8%～100%。结论 在安徽省首次分离到基因Ⅰ型JEV,与我国上海市及浙江省JEV分离株进化关系较近。

目的 调查江西省的虫媒病毒分布状况,在当地采集蚊虫标本进行病毒分离与鉴定。方法 2008-2009年夏季在江西省共选择8个标本采集点,使用诱蚊灯采集蚊虫标本,通过组织培养法分离病毒,并对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定;利用生物信息学技术对新分离病毒的序列进行分析,完成同源性和系统发生分析。结果 2008年采集到3属3种共计11916只蚊虫标本;2009年采集到4属5种共计5905只蚊虫标本;共分离到4株病毒,经鉴定均为流行性乙型脑炎(乙脑)病毒;新分离乙脑病毒与基因Ⅰ型乙脑病毒的同源性最高,系统进化结果显示,4株乙脑病毒均属于基因Ⅰ型。结论 在江西省分离到基因Ⅰ型乙脑病毒,与上海市和浙江省分离株进化关系较近。

目的 了解新疆维吾尔自治区(新疆)蚊虫携带辽宁病毒情况,为虫媒病毒病防治提供科学依据。方法 用镊子夹取法采集蜱虫标本,用诱蚊灯采集蚊虫标本,用细胞培养法分离病毒,并对分离到的病毒进行分子生物学分析。结果 用辽宁病毒特异引物对2011年采自喀什地区的蚊虫标本及采自伊犁地区的蜱虫标本进行PCR扩增,结果显示,在蚊虫标本中辽宁病毒核酸阳性率为23.0%(87/379),蜱虫标本中未检测到辽宁病毒核酸;从蚊虫标本C6/36细胞培养物中共分离到19株病毒,经鉴定为辽宁病毒。结论 在2011年采自新疆喀什地区的蚊虫标本中分离到多株辽宁病毒;在2011年采自伊犁地区的蜱虫标本中未检测到辽宁病毒;建议在新疆地区开展辽宁病毒对人、畜致病性等方面的研究。